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技術(shù)交流
植物組織培養(yǎng)技術(shù)
作者： [陳國愛] 文章來源： [本站原創(chuàng)] 點擊數(shù)：[3312] 更新時間：[2010-08-16]
植物的組織培養(yǎng)技術(shù)是克隆技術(shù)的一種形式，傳統(tǒng)的動植物繁殖都是通過雌雄性交換物質(zhì)完成的，也叫做有性繁殖，而組織培養(yǎng)技術(shù)則是通過某一植物的胚胎子細胞，通過組織培養(yǎng)進行復(fù)制“克隆”，即無性繁殖后代。“植物克隆”的目的：一是為了保護種質(zhì)資源，減少品種退化，避免病毒、病菌的侵染。因為有些植物本身就是無性繁殖的植物，品種容易退化，不能向其它植物那樣擁有適應(yīng)環(huán)境，抵御病蟲害的能力，面臨著品種劣化等生存危機；二是能夠加快育種速度和種苗繁殖速度，加快新品種，新技術(shù)的應(yīng)用推廣速度。
我所從1990年開始利用原植保室的陳舊設(shè)備進行組織培養(yǎng)技術(shù)研究，通過19年的組培研究，積蓄了豐富的組培基礎(chǔ)理論與實踐經(jīng)驗，形成了一支技術(shù)力量較強的專業(yè)骨干隊伍，在所領(lǐng)導(dǎo)的正確領(lǐng)導(dǎo)和大力支持下，現(xiàn)已組建成年生產(chǎn)脫毒苗能力為100萬株的種苗基地，至今，已成功地組培出甘薯、馬鈴薯、魔芋及各種名貴花卉和野生經(jīng)濟苗木等多個品種脫毒苗，并建立了無菌培養(yǎng)體系。
脫毒甘薯苗分別于2005年、2007年10月經(jīng)江蘇省徐州市甘薯研究中心的國家甘薯病毒檢測試驗室檢測，脫毒率達93.3%。這一鑒定結(jié)果：一方面充分肯定我所的甘薯脫毒技術(shù)水平，另一方面也為加快甘薯脫毒苗在全市的應(yīng)用推廣提供了強有力的理論依據(jù)?，F(xiàn)已在九縣一區(qū)試驗示范大面積推廣，該技術(shù)主要是采取剛出土的幼苗或塊莖上的幼芽，切下1—2cm長的莖尖，放在燒杯里加入少量的洗潔劑溶液，上面蓋好沙布，在流水下沖洗30 min，然后在無菌條件下依次用酒精、次氯酸鈉或升汞滅菌，再用無菌水沖洗3—5次，最后用無菌濾紙吸干水份，在雙筒解剖顯微鏡下用解剖刀去掉幼葉，直至露出半光滑的生長點，用解剖刀從0.1—0.3ｍｍ處切下來，接到裝有改良MA培養(yǎng)基的試管中，然后把試管口用棉花球塞上，上面再用牛皮紙包上帽，在紙帽上寫上接種日期，放到試管架上，根據(jù)植物各自的生理特點和對生態(tài)環(huán)境的要求，在無菌、適當(dāng)?shù)臏囟群鸵欢ǖ呐囵B(yǎng)條件下，使之生長，分化，通過30ｄ以上的培養(yǎng)，在試管內(nèi)慢慢地萌發(fā)幼芽，待小苗長到2--3ｃｍ長時，進行病毒檢測，淘汰未脫去病毒的幼苗，保留無病毒苗，再將無病毒小苗剪成一葉一節(jié)的莖段轉(zhuǎn)接到MS繼代培養(yǎng)基上，附加適量的生長調(diào)節(jié)素，一定量的蔗糖，瓊脂， PH值調(diào)5.8，光照強度1000－2000LX，光照時間10－14h，培養(yǎng)溫度（25±2）℃。30ｄ轉(zhuǎn)接一次，就這樣一生十，十生百…獲得一定量脫毒苗后，通過一周的煉苗，洗去脫毒瓶苗根部的培養(yǎng)基，移栽至事先消毒處理過的苗床中，溫度保持在22--23℃，相對濕度控制在85—95%，移栽成活率可達90%以上。